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CK-MB的测定方法

发布时间:2018-12-16    点击数:

CK-MB的检测是早期诊断急性心肌梗死的重要指标,检测方法包括酶质量法与酶活性法。测定CK-MB酶活性主要应用免疫抑制法,其原理是应用单克隆抗体与肌酸激酶中的M亚基结合,抑制CK-MM及CK-MB中的M亚基的活性,再测定B亚基的活力,将结果乘以2即为CK-MB的活力。CK-BB主要存在于脑组织,在血清中含量很低,可忽略不计。但对某些恶性肿瘤患者,脑神经损伤或平滑肌受损的患者血清中可有CK-BB增高,或出现线粒体CK(CK-Mt)。由于其活性不受抗M抗体的抑制,其B亚基活性与CK-MB中B亚基活性同时被测,结果再乘以2 ,此种情况下,CK-MB会异常增高,易引起AMI的误诊。

微粒子化学发光法是将包被单克隆抗体的顺磁性微粒和待测标本加入反应管中,标本中的抗原与微粒子表面的抗体结合,再加入ALP标记的抗体,经温育后形成固相包被抗原-抗体-酶标记抗体复合物。在电磁场中进行洗涤,很快将未结合的多余抗原和酶标记抗体洗去,加入底物AMPPD发光剂,AMPPD被结合在磁性粒子表面的ALP酶催化,生成稳定的中介体AMPD。AMPD很快分解,从高能激发态回到低能量的稳定态,同时发射出光子,这种化学反应持续而稳定,可达数小时之久,通过光量子阅读系统记录发光强度,并从标准曲线上计算出待测抗原的浓度,按质量单位(μg/ L)报告结果。微粒子化学发光法特异性强,与CK-BB、CK-MM等无交叉反应,避免了其他酶类、蛋白质、药物的干扰,具有较高的灵敏度和准确性。

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