1 标本采集前活动的指导应包括以下内容:
1.1申请单或电子申请单的填写:
检验申请单是重要的医疗文书之一,主要是临床医生根据患者主诉,症状或病程出的申请,其信息规范性与完整性对后续检验流程十分重要。检验人员,特别是检验医师,因为对检验项目的了解更全面、深入,应与临床医生一起探讨和评估检验项目的试验方法和临床价值,找出最直接、最特异、最有效、最经济的项目或项目组合。
检验申请单主要采用HIS系统开具电子版申请单,由检验申请者填写,打印的纸质申请单须字迹清楚,不得涂改。要按照申请单格式逐项填写。例如,在“年龄”项不得以“成”字代表所有成年人,应写明具体年龄;新生婴儿“姓名”项可填写“×××之子”;在“临床诊断”项,确诊病人必须填写,初诊病人可写“拟诊×××病”或“×××病?”,健康体检或普查时可写“体检”。此外,在某些特殊情况下,如突发事件中的昏迷患者,“姓名”项可填写“无名氏”。
1.2患者的准备——检验前指导:
合格的标本是检验结果准确性的前提。医护人员、标本采集人员、检验技术人员应了解标本采集前患者的状态要求和影响结果的非疾病性因素,并将相关的要求和注意事项告知患者,以求患者给予配合,使所采集的标本尽可能减少非疾病因素的影响,保证所采集的标本能客观真实地反映当前疾病的状态。
1.2.1生物周期的影响:体内许多物质随生物周期呈现出不同节律性的变化。
1.2.1.1昼夜节律对多种分析物浓度有影响。例如,血清促肾上腺皮质激素、皮质醇等在清晨6时左右浓度最高,随后下降,午夜12时降至最低。生长激素昼夜变化幅度达300-400%,皮质醇达180-200%。皮质醇具有促进糖代谢的作用,皮质醇水平昼夜节律变化可影响下午进行的葡萄糖耐量(OGTT)试验。血液IL-1、IL-12、TNF-α、INF-γ、CD4+细胞等昼夜节律变化正好与皮质醇相反。血清铁和胆红素在清晨最高。血钙在中午最低。白细胞计数在早晨较低而下午较高。血中促甲状腺素在深夜可达峰值,在正午时分最低。时间节律变化影响最大的检验项目是激素类,因此对这些项目需要规定统一采集标本的时间,明确标注采集时间。
1.2.1.2月经周期是成熟女性正常生理过程。月经周期3个阶段——月经期、卵泡期、黄体期——部分激素水平有差异。月经期,血中孕激素和雌激素降到最低水平。增殖期(卵泡期)因卵泡生长,分泌的雌激素愈来愈多,使血液中雌激素水平逐渐升高。分泌期(黄体期),成熟的卵泡排卵后生成黄体,黄体所分泌的孕激素作用于子宫内膜。在排卵期间,血清胆固醇水平降低。在中期或黄体期,醛固酮浓度大约是卵泡期的2倍。肾素活性在黄体期增加。绝经前胆固醇(CH)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于男性。
1.2.2情绪影响:精神紧张和情绪激动可影响神经-内分泌系统,可使儿茶酚胺、皮质醇、血糖等指标升高。
1.2.3年龄影响:由于许多检验项目的结果在不同年龄段存在差异,检验科已在LIS系统中根据不同年龄段分别设定参考区间加以区别,以消除年龄因素对结果的影响。
1.2.4性别影响:多数检验项目的结果在性别间存在一定差异。检验科已在LIS系统中根据不同性别分别设定了参考区间加以区别,以消除性别因素对结果的影响。
1.2.5妊娠影响:妊娠期间,平均血容量升高2600-3900 ml,导致血液稀释,血液成分浓度波动,尤其是部分微量元素等波动较大。白蛋白浓度下降并导致总蛋白浓度下降,急性时相蛋白,如纤维蛋白原升高导致红细胞沉降率(ESR)升高。雌激素升高使肝细胞结合蛋白及运载蛋白合成增加,例如,性激素结合球蛋白,甲状腺素结合球蛋白,皮质酮结合球蛋白等增加,导致总皮质醇与总甲状腺素升高等。
1.2.6种族影响:因种族间存在遗传特性和生活习性的不同,某些生理或病理指标有种族差异。如美国黑人的WBC计数比白种人低,而CK明显高于白种人和黄种人等。
1.2.7饮食影响:饮食对于多种检测指标,特别是生化指标影响较大。
①标准餐后,血中甘油三酯将增加50%,AST的活性增加20%,胆红素,无机磷,血糖水平增加15%,ALT及血钾水平上升15%,总蛋白、白蛋白、尿素、尿酸等增加5%。
②特殊饮食:高蛋白膳食可使血中尿素、尿酸、血氨升高;高脂肪饮食可使血中甘油三酯大幅度升高;高核酸饮食可导致尿酸明显增加;而香蕉,菠萝,番茄可增加尿5-羟基吲哚乙酸的排泄。
采血前应告知患者必须空腹8小时,且前一餐需清淡饮食,以清晨空腹为佳。但空腹时间过长,则会使血糖、蛋白降低而胆红素和某些氨基酸升高。此外,一些特殊检验,如内生肌酐清除率,需要前3天禁食肉类,以避免外源性肌酐的干扰。
1.2.8饥饿影响:长期饥饿可使血中多项指标发生改变。例如,胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白等降低;血肌酐、尿酸升高。血中T3、T4明显减少。
1.2.9运动影响:剧烈运动可加快机体有氧和无氧代谢,引起钾、钠、钙、肝功能、肾功能检验结果异常。轻度活动可引起血糖升高,继之皮质醇、胰岛素上升,与肌肉有关的酶类如CK、LD、AST都有不同程度的增加,以CK最为明显。因此必须嘱咐患者在安静状态或正常活动下收集标本,最好在患者休息30分钟后进行采血。
1.2.10吸烟影响:吸烟会摄入大量一氧化碳,一氧化碳与Hb的亲和力高于氧与Hb的亲和力,血中一氧化碳结合血红蛋白水平升高,RBC及Hb则因缺氧代偿性升高,同时WBC计数也升高。吸烟后血浆肾上腺素、皮质醇、醛固酮、游离脂肪酸、甘油三酯、癌胚抗原等均有所升高,而IgG活性下降。
1.2.11饮酒影响:饮酒会损害肝脏代谢功能。酒后2-4小时,血糖、碳酸氢盐下降,乳酸、乙酸、尿酸上升。长期饮酒,可导致血中ALT、AST、GGT升高。慢性酒精中毒者,可表现为血中胆红素、碱性磷酸酶、甘油三酯升高。
1.2.12饮茶和咖啡影响:茶叶和咖啡中的茶碱或咖啡因,可影响体内某些代谢环节。咖啡因可抑制磷酸二酯酶活性,使cAMP水平升高,促进糖酵解,使血浆葡萄糖水平轻度下降。咖啡因亦可激活脂肪酶,使血中游离脂肪酸升高。
1.2.13治疗性药物影响:某些甲状腺素类制剂能促进糖的吸收,增加糖原分解及糖异生作用,加速胆固醇转变为胆酸从粪便排出,因而造成高血糖和低胆固醇。有些药物可对造血功能、肝肾功能造成损害引起相关指标的变化。大量服用维生素C可导致血糖、胆固醇、甘油三酯、尿酸严重降低,使尿潜血、尿糖、尿酮体、尿亚硝酸盐出现假阴性反应。青霉素治疗患者,由于注入的青霉素90%以上通过尿排泄,导致尿蛋白的检查为假阴性。特别是申请细菌培养项目(如血培养)时,必须标注是否使用抗生素。
1.2.14成瘾性药物影响:成瘾性药物可使多项生化检测指标发生变化。吗啡可使血清AMY、LPS、ALT、AST、ALP活性升高,使胆红素、胃泌素、TSH、催乳素升高,使胰岛素、去甲肾上腺素、神经紧张素、胰多肽水平降低。大麻可使血中钾、钠、氯、尿素、胰岛素浓度升高,而血肌酐、血糖、血尿酸水平降低。海洛因可使PCO2、甲状腺素、胆固醇、血钾升高,而PO2及白蛋白降低。安非他命可使血中游离脂肪酸增高。
1.2.15季节影响:夏季的光照时间延长导致25羟基维生素D3浓度水平比冬天高。而总甲状腺素、三碘甲状腺原氨酸、促甲状腺激素释放激素、总胆固醇等水平在冬季较高。
1.2.16海拔影响:在不同海拔,由于适应性的需要,人体血清中某些成分的含量会发生变化,例如,红细胞计数、Hb、CRP水平升高。而血浆肾素、血清转铁蛋白、尿肌酐、雌三醇及肌酐清除率则随着海拔的升高而降低。
综上所述,在样本采集前,应向患者说明做该项检验的目的及注意事项,在取样过程中,特别是抽取脑脊液、胸腹水、骨髓穿刺时,消除患者的恐惧和紧张,同时避免饮食、烟、酒、茶、咖啡及药物等对于患者样本的影响,尽力争取患者配合,特别是由患者自己留取标本时,如中段尿、24小时尿、痰、便等标本,要告知留取方法和注意事项,以保证采集到高质量的标本。采血前应告知患者必须空腹8小时,且前一餐清淡饮食,以清晨空腹为佳。
1.3特殊采集时机:根据不同的检测要求有不同的指定时间。细菌培养尽可能在高热、寒战、抗生素使用前采集标本。心肌肌钙蛋白T或I测定时,选择心肌梗死后4-6小时采样较好。病毒性感染抗体检查时,在急性期及恢复期,采取双份血清检查对诊断意义较大。药物监测应根据药物峰值效应,在药物分布期结束后采集标本。如在药物输液结束后2-4小时进行,而地高辛、洋地黄毒苷在输液后6-8小时进行。
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2 标本采集活动的指导应包括以下内容:
2.1 接受原始样品采集的患者身份的确认;明确标本的种类,采集前必须核对标本种类与检验项目相匹配;明确标本的种类,采集前必须核对标本种类与检验项目相匹配。
2.2确认患者符合检验前要求,例如:禁食、用药情况(最后服药时间、停药时间)、在预先规定的时间或时间间隔采集样品等;检验项目的血液标本原则上要求空腹测定(餐后8小以上)。
2.3血液和非血液原始样品的采集说明、原始样品容器及必需添加物的说明;
2.3.1需要采集血液的项目,必须核对采集用的真空采集管管帽颜色与项目(条码标签上)要求一致。
2.3.1.1紫帽管2ml:血液常规、HCV-RNA、同型半胱氨酸、糖化血红蛋白等
2.3.1.2蓝帽管3ml:凝血项目专用
2.3.1.3黑帽管:血沉项目专用
2.3.1.4黄帽管4ml:常规生化项目(肝、肾、心肌、血脂、电解质、电泳等)和常规免疫(术前8项、特种蛋白、肿标、自身抗体等)
2.3.1.5绿帽管2ml:急诊生化项目(肝、肾、心肌、电解质、血氨等)
2.3.1.6灰帽管2ml:急查乳酸、血糖专用管
2.3.2采集标本的量必须满足要求
2.3.2.1蓝帽管3ml:凝血项目专用,要求血液采集到真空管的标记位,才能保证抗凝管中固有的抗凝剂与血液的比例=1:9。否则,检验结果将产生严重错误。
2.3.2.2黑帽管:血沉项目专用,要求血液采集到真空管的标记位,才能保证抗凝管中固有的抗凝剂与血液的比例=1:4。否则,检验结果将产生严重错误。
2.3.3尿液专用管:
2.3.3.1 尿液常规项目:尿量大于2/3管。
2.3.3.2 24小时尿液准确记录总量,尿总蛋白大于2ml;尿17羟(酮)类固醇和VMA需要20ml(2管尿液)
2.3.4抗凝标本(除黄帽管)外,采集血液后,立即颠倒混匀6-8次。保证标本抗凝。
2.4 当原始样品采集作为临床操作的一部分时,应确认与原始样品容器、必需添加物、必需的处理、样品运输条件等相关的信息和说明,并告知适当的临床工作人员。采血时间、体位、止血带的使用、采血部位和输液都会影响检验结果。
2.4.1采血时间:非急诊标本,一般采用空腹8小时候采集的标本,清晨空腹血液标本常用于临床生化定量测定,重复性好。急诊标本,根据临床需求及时采集。
2.4.2体位:取血时姿势的变化可影响到血清或血浆中某些成分的变化。从卧位变为坐位或直立位时,血清中大分子物质(如蛋白质)浓度因血管水分扩散到组织间隙而升高。临床常采用坐位采血。
2.4.3压脉带的影响:静脉采血时,应尽量缩短压脉带的压迫时间,最好能在1分钟内采完。见到回血,立即解开压脉带。
2.4.4输液影响:输入碳水化合物、氨基酸、蛋白质、或电解质的患者应在输液结束1小时后采血,而输入脂肪乳剂的患者应在8小时后采血。并保证在输液对侧采血,避免通过静脉置流管采血。
2.4.5采血部位影响:动脉血、毛细血管血、静脉血中的成分存在一定差异。血液标本采集时,应根据检验目的与检验项目,选择合适的采血部位。当测定血常规项目时,推荐使用静脉血,而不用末梢血。
2.5 为保证原始样本的可追溯性,所有采集标本采用条码标签进行标记。通过HIS系统与LIS系统,标本条码中包括原始样品采集者身份及采集日期和采集时间。
2.6 标本采集后,要求立即送往检验室处理。若无法立即送检,应按照相应采集样品运送到实验室之前的正确储存条件及时处理。未及时处理的标本会导致标本内物质变化,检验结果出现严重的偏差,比如电解质(细胞内外交换)、血糖(细胞消耗)、血细胞(破坏)等。
2.7 采样物品使用后要进行安全处置,保证符合医疗锐器使用管理。双向无菌针头使用后放入专用锐器盒。
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3 样品采集后运送的指导:
3.1标本采集后的运送时间应适合申请检验项目的特点;原则上,采集的标本应第一时间(60分钟内)送达实验区,特别是血常规、尿常规等需要细胞学形态监测的项目,必须在采样后4小时内完成检测。凝血项目的标本也应在采样后4小时内完成检测。未能及时送检的标本,应储存在2-8℃冰箱。检验科接收标本的最大时限原则上4小时。
3.2保证收集、处理样品所需的特定温度范围,使用指定的保存剂,以保证样品的完整性;
3.3确保运送者、公众及接收实验室安全,并符合规定要求。
3.3.1患者样品采集区域应有隔开的接待/等候和采集区。这些设施应考虑患者的隐私、舒适度及需求(如残疾人通道,盥洗设施),以及在采集期间的适当陪伴人员(如监护人或翻译)。执行患者样品采集程序(如采血)的设施应保证样品采集方式不会使结果失效或对检验质量有不利影响。
3.3.2样品采集设施应配备并维护适当的急救物品和复苏设备,以满足患者和员工需求。
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4 样品接收的指导:
4.1 样品可通过申请单和标识明确追溯到确定的患者或地点;所有取自原始样品的部分样品应可明确追溯至最初的原始样品。
4.2 制定并文件化样品接受或拒收的标准:
4.2.1 样本拒收标准:
4.2.1.1标本标签信息与检验申请单信息不一致;
4.2.1.2标本取样量不准确,标本量太少不足以完成检验目的所要求的检测,未按照规定要求留取标本,凝血检验标本取样量过多或过少(超过或低于标准取样量的20%);
4.2.1.3抗凝标本凝固
4.2.1.4标本容器破损,标本流失或受污染
4.2.1.5严重溶血和脂血标本
4.2.1.6采集时间或接收时间超出规定时间
4.2.2 对不合格标本的处理:及时与送检部门相关人员联系,建议其重新核实或重新取样,对特殊标本或再次取样确有困难则可与临床医生协商进行部分内容的检验,在检验报告上须注明标本不合格原因。
4.3 如果患者识别或样品识别有问题,运送延迟或容器不适当导致样品不稳定,样品量不足,样品对临床很重要或样品不可替代,而检验科仍选择处理这些样品,应在最终报告中说明问题的性质,并在结果的解释中给出警示。
4.4须通过样本签收系统记录接收的所有样品。应记录样品接收和(或)登记的日期和时间,同时也应记录样品接收者的身份。
4.5授权人员应评估已接收的样品,确保其满足与申请检验相关的接受标准。
4.6 检验科对急诊样本进行24小时以急诊方式进行检测,血液、尿液、粪便常规项目在30分钟内完成检测,急诊生化项目、急诊凝血项目在90分钟内完成检测。当临床医师对特定标本要求进行加急检测时,检验科采取急诊方式执行检测。
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5 检验前处理、准备和储存的指导:
5.1检验科具有保护患者样品的程序和适当的设施,避免样品在检验前活动中以及处理、准备、储存期间发生变质、遗失或损坏。
5.1.1血液标本多采用专用真空采血管(塑料材质);
5.1.2尿液标本采用尿液专用管;
所有标本容器采用国家食品药品管理审批材料,所有采集标本进行条码化标签管理,以满足检验前标本的处理、储存,保证样本不发生变质、遗失或损坏。
5.2检验科规定了对同一原始样品申请附加检验或进一步检验的时限。检验后标本储存最主要目的就是为了必要时的复检,申请附加的检验项目必须在标本中待测物稳定期内进行。超出稳定期的项目不能进行附加检验。
5.2.1常规生化项目(黄管):可在6小时内进行附加项目申请。
5.2.2急诊生化项目、血常规、急诊凝血项目:可在4小时内进行附加项目申请
5.2.3常规免疫项目(黄管):可在2天内进行附加项目申请。